液相色谱柱是液相色谱仪的重心,咱们正在运用进程中不免会碰见种种各样的题目,本日就把液相色谱柱最常见的少许题目和管理要领分享给民多
⑩检测器与纪录仪超过校正弧线。管理要领为查验纪录仪与检测器,重作校正弧线.做HPLC判辨时,柱压担心靖,源由何正在?怎样管理?
柱压过高是HPLC柱用户最常际遇的题目。其源由有多方面,况且每每并不是柱子自己的题目,您可按下面办法查验题目标起因:①拆去包庇预柱,看柱压是否还高,不然是包庇柱的题目,若柱压仍高,再查验;
③将柱子的进出口反过来接正在仪器上,用10倍柱体积的活动相冲刷柱子,(此时不要相接检测器,以防固体颗粒进入活动池)。这时,假使柱压仍不降低,再查验;只用于运用过的柱子。
④转换柱子入口筛板,若柱压降低,阐发您的溶剂或样品含有颗粒杂质,恰是这些杂质将筛板阻碍惹起压力上升。若柱压还高,请与厂商合系。寻常景况下,正在进样器与包庇柱之间接一个正在线过滤器便可避免柱压过高的题目。
不少做色谱分辨试验的人遭遇过如许的状况:失慎未实时添补活动相,泵将溶剂瓶中的活动相吸干了,HPLC体系由此而逗留办事了。这样景况是否会损坏色谱柱?泵是否已将色谱柱中全盘活动相都排干了?液相色谱柱还能运用吗?本相上,假使泵将溶剂瓶中的活动相吸干,并不会形成色谱柱的损坏。纵然泵中充满了气氛,泵也不会将气氛排入色谱柱。由于泵只可输送液体,而不行输送气氛
比拟之下,另一个更可以爆发的景况是忘却盖上色谱柱两头的密封盖或盖子太松而使色谱柱变干。同样,一切色谱柱枯竭的景况不太容易爆发,多半可以只是色谱柱两头的几个毫米变干了,因挥发掉全盘溶剂是色谱柱变干须要相当长的期间。纵然色谱柱真的变干了,也不愿定就不成救药了。能够考试用一种齐备脱气的、表面张力低的溶剂(如,经氦气脱气的甲醇)冲刷色谱柱以除去气体。较低的表面张力有帮于浸润填料表面;已脱气的溶剂应当可能溶化并去除滞留正在填料中的气体。色谱柱约莫须要(以1mL/min的流速)冲一个幼时或更多的期间被彻底浸润,规复到寻常状况。
加热回流脱气,脱气恶果最佳,但无法坚持;氦脱气,此本领脱气恶果佳,能除去百分之九十以上的气氛,但氦气价值太贵,是以用的不多;真空脱气,恶果仅次于氦脱气,但脱气进程中容易形成样品溶液挥发失掉;超声脱气,只可脱去约百分之三十的气氛,但正在实践室中最常用。目前依然尽量争取用正在线脱气,便利且恶果好。
设定泵运用一个孑立通途(A),翻开Purge阀,流速5mL/min,提起其他溶剂瓶内的溶剂过滤头直至脱节液面,察看这些通途(B、C、D)内的溶剂是否跟着活动,寻常时均不应活动。